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HPLC应用非常广泛，几乎遍及定量定性分析的各个领域。
使用液相色谱仪时，液体待检测物被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，液相色谱仪通过检测器得到不同的峰信号，后通过分析比对这些信号来判断待侧物所含有的物质。