万古霉素是由链霉菌产生的, 结构复杂的糖肽类抗生素，药力较强，具有肾毒性，只有在其他抗生素对病菌无效时才会被短期使用于抢救，高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS\MS）是集高效液相色谱（HPLC）对基质复杂的组分的高分离度和质谱（MS）对物质准确定性和高灵敏度于一体的检测分析手段，适用于检测基质复杂的样本。微源实验室查阅相关文献资料，利用HPLC-MS\MS对某动物源性样品进行了检测。

标准品溶液配制：**称取适量万古霉素盐酸盐于容量瓶中，加入0.1%甲酸水溶液定容至刻度并进行超声溶解得到1000μg/mL万古霉素标准储备溶液；吸取1.0mL万古霉素标准储备溶液至容量瓶中，并用0.1%甲酸水：乙腈（95:5，V/V）溶液定容至刻度得到10μg/mL万古霉素混合标准中间溶液，混合标准中间溶液用0.1%甲酸水：乙腈（95:5，V/V）溶液稀释，配置成浓度为5.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、50.0μg/L、100.0μg/L的标准工作溶液，标准工作溶液需在低温环境避光保存，试验过程中现用现配。

微源实验室

样本处理：取样品约500g粉碎机搅碎，装入洁净容器密封，于-18℃以下保存。实验称取已处理样本5g若干份置于离心管中，加入提取液20mL，按照5.0μg/kg、10.0μg/kg、50.0μg/kg三个水平分别添加万古霉素混合标准溶液，同一水平测定10次。涡旋混匀后冷冻离心5min，将上层清液用纤维滤纸过滤转移至另一离心管中后，加入0.5gPSA吸附剂，涡旋混匀，冷冻离心10min。

净化：加入3mL0.1%甲酸甲醇溶液和6mL的2%甲酸水溶液活化StrataX-C柱，待活化结束后加入5mL待净化样本的上清液；加入3mL二次纯水淋洗一次，纯水流尽后加入3mL甲醇再淋洗一次，待淋洗完毕后将StrataX-C柱吹干，放置于试管，用3mL10%氨化甲醇进行洗脱，完毕后将StrataX-C柱进行氮吹，氮吹至近干，加入0.1%甲酸水：乙腈（95:5，V/V）1mL定容，使用涡旋混匀器对溶液进行涡旋，过0.2μm的两相膜，过滤后将处理好的样本转移到进样小瓶。

质谱条件：离子源：ESI；扫描方式：正离子扫描；检测方式多反应监测（MRM）；电离电压：3.2kV；离子源温度：110℃。

通过HPLC-MS/MS法对万古霉素进行检测，该方法精密度高重复性好，对禽畜的用药量符合国家标准，为万古霉素的残留检测和食品安全提供了实验案例。实验方法操作简便、快速、可靠、稳定。微源检测实验室通过针对不同药物制剂样品进行前处理，可以利用高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）、气质联用（GC-MS）等方法，对万古霉素的含量变化进行检测对其进行质量控制。实验室工程师生物药工艺残留方面项目经验丰富，可为医药、化工等各领域样品科研测试需求，针对性制定检测流程并提供检测报告。欢迎致电咨询！