检测技术服务:百泰派克生物科技BTP客户案例：利用Edman降解法对重组Der f 3的蛋白条带进行N端测序--检测技术服务详情

关键词：百泰派克生物科技,N端Edman测序,蛋白Edman测序,百泰派克生物科技,生物药物表征,生物药物多组学,优质服务商,蛋白质组学,代谢组学,tmt,抗体测序,itraq,蛋白质谱鉴定

期刊：Molecular immunology；影响因子: 4.2397

原文链接：DOI: 10.1016/j.molimm.2019.02.018

研究对象：气道上皮细胞

研究目的：Der f 3对气道上皮屏障影响及诱导炎症的分子途径研究

研究手段：N端Edman测序等

研究内容及结论：过敏原的蛋白酶活性被认为参与了过敏性疾病的发病机制。来自粉尘螨（Dermatophagoides farinae）的主要过敏原Der f 3具有丝氨酸蛋白酶活性，但其免疫发病机制尚不清楚。该研究旨在探讨Der f 3对气道上皮屏障的影响，以及其诱导炎症的分子途径。采用RNA-seq检测支气管气道上皮细胞（AEC）中天然Der f 3和热灭活（H）Der f 3的差异表达基因，并结合实时荧光定量PCR（RT-PCR）和ELISA进行验证。与其他蛋白酶过敏原（如在AECs中诱导Th2促进警报素（IL-25、IL-33、TSLP））不同，Der f 3诱导促炎细胞因子和趋化因子包括IL-6、IL-8和GM-CSF，它们已知促进Th17反应。这些促炎介质是由Der f 3通过MAPK和NF-κB通路以及存储操作的钙信号通路诱导的。A549和BEAS-2B细胞的小干扰RNA沉默表明，Der f 3对AECs的激活主要依赖于蛋白酶激活受体2（PAR-2），而PAR-1也是AECs完全激活所必需的。PAR-1

和PAR-2的双敲除在很大程度上损害了Der f 3诱导的IL-8的产生和随后的信号通路。该研究的数据表明，Der f 3通过PARs-MAPK-NF-κB轴诱导人上皮细胞系中的促炎介质。该研究结果提供了Der f 3可能触发倾斜于Th17的对室内尘螨过敏反应的分子机制。

利用Edman降解法对重组Der f 3的蛋白条带进行N端测序，该服务由北京百泰派克生物科技提供。序列分析结果表明重组的Der f 3在渗析后达到成熟。

参考文献：Li B, Zou Z, Meng F, et al. Dust mite-derived Der f 3 activates a pro-inflammatory program in airway epithelial cells via PAR-1 and PAR-2[J]. Molecular immunology, 2019, 109: 1-11.

百泰派克生物科技-您身边的生物质谱专家

北京百泰派克生物科技有限公司（Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP）从事以生物质谱为依托的生物药物表征，大分子物质（包括蛋白质、多肽、代谢物）质谱分析以及小分子物质检测服务。公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务，业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等。7大质量控制检测平台，服务3000+企业，10000+客户的选择，致力于为您提供yōu质的生物质谱分析服务!

百泰派克生物科技-生物药物表征，生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司（Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP）从事以生物质谱为依托的生物药物表征，大分子物质（包括蛋白质、多肽、代谢物）质谱分析以及小分子物质检测服务。

公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

7大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

服务3000+企业，10000+客户的选择；

致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!