检测技术服务:两种软电离技术——ESI和MALDI--检测技术服务详情
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随着生物化学的发展,质谱技术也在不断改进和创新,包括出现各种软电离技术,如快原子轰击(FAB)、场解吸电离(FD)、二次离子质谱(SIMS)、等离子体解吸(PD)、激光解吸(LD)、电喷雾电离(ESI)、热喷雾(TSI)和基质辅助激光解吸电离(MALDI)等。其中,ESI和MALDI是目前应用zuì广泛的两种软电离技术。
在1980年代,Fenn首先开发了一种新的样品电离技术,该技术使用具有高压电场(通常为4000电子伏特)的金属注射器。样品溶液通过该高压注射器产生带电液滴并被送入电离室。电离室中的干热气体将这些带电液滴蒸发,并将它们分解成大量带有一个或多个电荷的离子,然后进入分离室进行分析。这种电离技术的主要特点是,当样品分子被电离时,可以保持整个分子的完整性而不产生碎片离子。因此,它可以用于蛋白质和核酸等生物大分子的分析。由于在电离过程中样品溶液中会形成带电液滴,因此这种电离技术称为电喷雾电离(ESI)技术。
电喷雾质谱采用液体取样,因此可以与高效液相色谱、毛细管电泳等高效分离方法相结合,更好地分析复杂样品。
在1980年代后期,Hillenkamp和Karas等提出了另一种电离技术,MALDI技术。它以一定比例混合样品和基质(通常是有机酸),然后将混合物放在探头上。在脉冲激光的照射下,样品分子和基质分子同时吸收激光的能量并被汽化。汽化的基质分子很容易释放出质子,然后这些质子可以被样品分子捕获,从而使样品分子带正电。带电的样品分子将在强电场的作用下被加速进入飞行管进行分析。
MALDI技术背后的原理是用脉冲激光电离基质分子,同时蒸发样品分子。在气相中,基质分子将质子转移到样品分子上,使样品分子带电,为质谱分析做好准备。基质吸收了激光的大部分能量,避免了激光破坏样品分子并仅产生准分子离子。此外,脉冲激光可作为一种电离方法,减少激光与样品分子间的相互作用时间,降低相互作用温度,避免样品分子的热分解。因此,MALDI质谱法也可用于生物大分子的分析。
与早期质谱的硬电离方法相比,包括ESI和MALDI在内的软电离技术对样品分子的破坏性较小,可以保持整个分子的完整性。
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参考文献:
Fenn J B, Mann M, Meng C K, et al. Electrospray ionization for mass spectrometry of large biomolecules. Science, 1989, 246(4926): 64-71.
2. Hillenkamp F, Karas M, Beavis R C, et al. Matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry of biopolymers. Analytical chemistry, 1991, 63(24): 1193A-1203A.
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