光毒性检测是化妆品安全性评价的重要内容之一,皮肤接触到光敏性物质后,在光照下可能产生局部或全身的毒性效应。根据斑马鱼胚胎的生长发育状况可以评价受试物的光毒性。
【评价原理】
将斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的受试物溶液,采用同等剂量的光进行照射,一定时间段后记录斑马鱼胚胎的死亡率,确定50%试验鱼胚胎死亡的受试物浓度,用LC50表示。
【实验方案】
配制一定浓度系列的受试物溶液,在斑马鱼发育初期(4hpf-6hpf)分别水溶加入受试物,同时设置正常对照组。受试物组经过同等剂量的光照后,分别观察每组斑马鱼的发育状况,以卵凝结、体节异常、尾部未分离等判定胚胎死亡。记录每组斑马鱼胚胎的死亡率,绘制“浓度-死亡率”效应曲线,计算LC50值。
【结果展示】
1、斑马鱼胚胎死亡判定
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图1.斑马鱼胚胎死亡表型图
2、LC50值:“浓度-死亡率”效应曲线
图2. 斑马鱼胚胎“浓度-死亡率”效应曲线
【评价结论】
经实验比对,斑马鱼胚胎随着受试物浓度的增加逐渐出现死亡特征,LC50
值为31.5μg/ml。