干细胞质量检测-飞凡检测

2019年ISSCR上，WiCell Research Institute（下文中简称为WiCell）发表了一篇关于人多能干细胞（hPSC）质量的poster，文中强调了细胞质量对研究的重要性。低质量的细胞会影响实验结果的重现性、导致错误的实验结论、浪费时间、消耗资源。

WiCell一共收集了来自31个不同实验室的1732株iPS细胞系，截止到poster发表之日，一共有839株细胞系已经完成检测，并且这839株细胞系已被提供给了更多的科研机构和院所，但令人震惊的是，其中超过1/3的细胞株（285株细胞系）未通过WiCell的常规细胞质量测试！WiCell进行的细胞质量鉴定项目（括号内为实际检测机构），包括

 解冻复苏及使用光学显微镜观察的自发分化（WiCell）

 核型检测：G-banding（WiCell）

 均一性：使用Promega PowerPlex 16 HS System检测Short Tandem Repeat (STR) （UW‐Madison Hospitals and Clinics）

 无菌测试（Bacteriostasis/Fungistasis）：使用direct transfer method进行14天的培养（Steris）

 支原体检测：使用Lonza Mycoalert或Biological Industries EZ PCR Mycoplasma Kit（WiCell）

 如上图所示，这285株未通过细胞质量标准的原因如下：

 61%的细胞系的核型发生改变，其中54%的核型异常原因为recurrent abnormalities，balanced translocation出现的核型异常占20%。

 10%的细胞系发生STR异常，包括细胞系的交叉污染、身份错配或性别错配。实际情况可能更为严重，由于某些同一性别的特定细胞系也可能被错误识别而未能检测出。

 超过25%的细胞系（80株以上）冻存后无法复苏，或无法进行贴壁、无法扩增或是分化区域太多。

 12株细胞系未通过无菌测试，1株细胞系支原体检测阳性。

 由此可见，细胞质量对hPSC研究至关重要，获得高质量的hPSC是研究成功的必要条件，而在日常对hPSC进行维持培养的过程中也应选择高质量的hPSC培养基并定期对细胞进行质量监控。

飞凡检测生物依托拥有多年服务经验的技术团队和先进的仪器设备，并严格按照《干细胞制剂制备与质检行业标准（试行）》中提及的10种必检项目及检测要求，快速地为客户提供全方位的干细胞质量检测服务。

质量检测是为了保证干细胞经特定体外处理后对其安全性、有效性和质量可控性进行较全面的质量检测，包括但不限以下10各方面：

细胞鉴别：细胞形态、遗传学、代谢酶亚型谱分析、表面标志物鉴定、特定基因表达产物鉴定。

存活率及生长活性：活细胞计数、细胞倍增时间检测、细胞周期检测、克隆形成率、端粒酶活性检测等。

纯度和均一性：细胞表面标志物鉴定、遗传多态性、特定生物学活性。

无菌试验和支原体检测：依据现行版《中华人民共和国药典》中的生物制品无菌试验和支原体检测流程。

细胞内外源致病因子检测：牛源特定病毒的检测（如使用过牛血清）；猪源细小病毒检测（如使用过胰酶等猪源材料等。

内毒素检测：应根据现行版《中华人民共和国药典》中的内毒素检测流程。

异常免疫学反应（异体来源）：对人总淋巴细胞增殖、对不同淋巴细胞亚群增殖能力的影响、对相关细胞因子分泌的影响。

致瘤性：免疫缺陷动物体内致瘤试验。

生物学效力试验：检测干细胞分化潜能、诱导分化细胞的结构和生理功能、对免疫细胞的调节能力、分泌特定细胞因子、表达特定基因和蛋白。

培养基及其他添加成分残余量检测：牛血清蛋白、抗生素、细胞因子等残留检测。