鸡卵清蛋白(OVA)ELISA试剂盒操作步骤：从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃；设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加；除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min；弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）；每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min；每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。鸡卵清蛋白(OVA)ELISA试剂盒问题解析：问：设计ELISA复孔检查时，是对同一个样品做两次稀释，再分别加到板上的两个孔；还是只稀释一次，然后吸取两次分别加入到两个孔？上海轩泽康生物技术解答：1）前者测的是稀释和移液的误差，后者只有移液误差。2）一般都是稀释一次，分两孔吧。同浓度的分复孔。3）由于是从同一原液稀释，一般不考虑稀释误差（稀释误差时存在的），都是稀释到想要的倍数直接分孔（而不是一一稀释，这样可以使稀释误差减小）4)复孔是为了排除移液体积板的影响，以及其他系统误差的，要求复孔的浓度时一致的。稀释后分孔能满足此要求，一一稀释不能。