Edman降解法是蛋白质N末端序列分析的经典方法,其利用一系列化学反应每次从肽链上切下一个氨基酸并进行鉴定,如此循环以完成N末端氨基酸的序列测定。
Edman降解法主要用到的试剂为异硫氰酸苯酯(PITC),PITC能与蛋白质多肽的N末端氨基酸残基发生偶联反应生成苯氨基硫甲酰衍生物(PTC-肽),在三氟乙酸处理下,N末端氨基酸的肽键被选择性的切断,释放出含有该末端氨基酸的噻唑啉酮苯胺(ATZ)衍生物,ATZ-衍生物不稳定,在酸性条件下可转化为稳定的苯乙内酰硫脲(PTH)衍生物,即PTH氨基酸。至此,就获得了蛋白质N末端的第一个氨基酸,将缺少了一个氨基酸的蛋白质多肽进行回收重复进行以上反应,并对切割下来的氨基酸进行鉴定,如此循环,直到完成N末端氨基端的序列测定。
百泰派克公司采用岛津公司Edman测序系统,为广大科研工作者和科研客户提供基于Edman的N端测序服务技术包裹,可对纯化后蛋白产物、抗体以及蛋白疫苗的N末端氨基酸序列进行准确测定。此外,百泰派克生物科技也建立了以先jìn的LC-MS/MS技术进行N-端测序的平台,可以测出封闭和修饰的蛋白质末端,与Edman降解法形成互补,保证N端测序服务的顺利进行。
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