蛋白质表面存在一些酸碱性离子基团,如氨基、羧基、酚基、巯基等,因此蛋白质与氨基酸一样本身带有净电荷。在不同pH的溶液中解离所带的正负电荷不同,在某一pH值的溶液中,其解离的正负电荷相等,这时溶液的pH值就称为蛋白的等电点(isoelectric point, pI)。蛋白质的等电点与其空间结构有关,因此对于某一特定蛋白质来说其等电点也是固定的。
当蛋白质处于与其等电点相同pH的溶液中时,在该溶液中的溶解度zuì小,可以从溶液中沉淀出来,故蛋白质等电点常用于蛋白质的分离和提纯。蛋白等电点的测定方法有传统的沉淀法和经典的等电聚焦法等。
沉淀法利用蛋白质在等电点时溶解度zuì低的原理,在醋酸与醋酸钠配制的不同pH缓冲液中加入待测的样品蛋白质,比较其在不同pH的缓冲液中的沉淀量,沉淀量zuì多的缓冲液所对应的pH就是该蛋白的等电点。
等电聚焦法利用蛋白质在等电点时净电荷为零的原理将待测蛋白质在特殊的缓冲液中进行聚丙烯凝胶电泳,这种特殊的缓冲液为两性电解质,可以在凝胶内形成连续的pH梯度,当电泳完毕时,蛋白质迁移到的位置对应的pH就是该蛋白质的等电点。
百泰派克生物科技基于毛细导管等电聚焦(cIEF)提供蛋白等电点的测定一站式技术服务,适用于多种氨基酸、多肽、重组蛋白、酶类、单克隆抗体等样品的等电点测定,欢迎免费咨询。
百泰派克生物科技-生物药物表征,生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。
公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;
获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;
业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;
7大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;
服务3000+企业,10000+客户的选择;
致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!