亲和柱的概念
亲和柱/亲和膜,都是医类分离器.如除内毒素亲和柱,以Sepharose4B为基质,配基为组氨酸,壳聚糖,季铵盐等
实验采用亲和柱-荧光光度法快速测定了鲜牛乳及乳粉中黄曲霉毒素M1.试样经过离心、脱脂、过滤后,滤液经过键合有黄曲霉毒素M1特殊抗体的亲和柱净化,此抗体对黄曲霉毒素M1具有专一的识别能力,赭曲霉亲和柱报价,黄曲霉毒素M1键合在氯霉素、等亲和柱分离柱中的抗体上.将亲和柱上杂质除去,通过分离柱洗脱,加入溶液衍生,以提高测定灵敏度.衍生化后的洗脱液于荧光光度计中测定黄曲霉毒素M1,检测低限为0.01μg/kg,在0.1-1.0μg/kg范围内,回收率为89.6%-96.1%,变异系数为0.52%-5.8%,分析一个样品的时间小于30min.,分析过程中不使用黄曲霉毒素M1标准物质.用FAPAS的参考标样证实了检测方法、分析仪器和操作人员得到的结果是准确可靠的。
亲和柱净化步骤
注意:整个纯化过程尽量不要让柱子干燥!
----3mL柱管取出上方堵头,减去上堵头螺纹下突出部分,插回柱子上,另一端与20mL针筒固定后使用;将1mL柱管上方堵头取出后斜剪断,赭曲霉亲和柱,然后再插回柱子上(柱管内偶见有小气泡属正常现象,赭曲霉亲和柱哪家好,不影响亲和柱的使用);
----准确移取上述混匀滤液,注入针筒中,调节针筒压力使其以2秒/滴的速度缓慢通过亲和柱;
----用20mL 水冲洗柱子(对于饲料及玉米加工副产品等颜色较深的样液,赭曲霉亲和柱价格,先用10mL 0.1%吐温20-PBS清洗,再用10 mL 10%水冲洗柱子,之后用10mL水冲洗柱子。
),流速1秒/滴,弃去流出液,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体;
----准确加入1.5mL(色谱级)洗脱,流速自然重力,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体。
收集全部洗脱液,进行相关测定。
你对亲和柱了解多少?
亲和柱可以应对不同复杂的样品基质,实现样品中目标毒素的有效回收,回收率总体保持理想。
亲和柱中含有特异性抗体紧密附着在载体上,这些抗体可以与样品中的毒素特异性结合,保存在亲和柱中,进一步洗脱可以得到待检测的毒素。
适用于浓缩和纯化粮食、坚果或者牛奶等复杂基质中的毒素样品的提纯。
主要应用于赭曲霉素,呕吐毒素和玉米赤霉素等毒素的提取和净化。
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