高效液相色谱的系统组成
HPLC 系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。
其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。
此外,还可根据需要配置梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC 仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。
制备型HPLC 仪还备有自动馏分收集装置。
高效液相色谱基线漂移的解决方法
(1)控制色谱柱和流动相的温度,河北高效液相色谱,并在测试前使用热交换器。
(2)采用高效液相色谱级溶剂、高纯度盐和添加剂流动相在使用前脱气,用于在线脱气或氦气脱气。
(3)用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流动槽必要时可使用1N硝酸(不要使用盐酸)
(4)移除障碍物或更换管子。
参照检测器手册替换流单元格窗口。
(5)改变比率或速度。
为了避免这一问题,可以定期检查流动相的组成和速度。
(6)用中等强度的溶剂冲洗并改变流动相,用10-20倍体积的新流量冲洗相对于分析柱使用离子对试剂和缓冲盐时,应注意平衡柱。
(7)检查流动相的组成采用好的化学试剂和高效液相色谱溶剂8改变分析条件。
(8)使用保护柱,高效液相色谱方法,如有必要,定期在样品之间或分析期间用强溶剂冲洗柱。
(9)重置基线。
使用了一个新的移动相。
(10)将波长调整到很大吸收波长检测波长的重新选择。
HPLC对流动相的一般要求
流动相就比如人体的血液,高效液相色谱价格,其质量直接影响到整个系统的正常运行与否。
© 应该使用HPLC级的溶剂,不能互相混溶的溶剂不可以直接切换!
© 注意溶剂的截止波长。
截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的很低波长,低于该波长后,溶剂会有很强的紫外吸收,从而影响极限的稳定性、干扰对所分析物质的检测。
© HPLC所使用的水必须是新鲜的和经过0.45μm滤膜过滤过的。
建议每天更换新鲜的水。
长期不用时,必须把使用水的管路用有机的溶剂置换,防止长霉。
© 仪器使用完后要采用适当的溶剂冲洗等方法维护色谱柱和系统。
如果使用了缓冲盐一定先将盐要冲洗干净。
© 当有流路堵塞时,可以尝试将之反接后冲洗。
污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命,并且影响泵和系统的的性能。
这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(pH 4 至7) 中尤其如此。
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