高效液相色谱分析法和气相色谱法的区别
气相:气相色谱是一种物理的分离方法。
利用被测物质各组分在不同两相间分配系数(溶解度)的微小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次的分配使原来只有微小的性质差异产生很大的效果而使不同组分得到分离。
液相:高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上引用了气相色谱的理论。
在技术上,且流动相改为高压输送;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时,柱后连有高灵敏度的检测器可对流出物进行连续检测。
高效液相色谱仪的使用保养以及故障处理--使用试管的问题
1、试管的洁净问题。
高效液相色谱分析法是一个很灵敏的分析方法,高效液相色谱,如果因使用不洁净的试管,便会影响试验结果的准确性。
例如,在用甲醇作溶剂来溶解样品时,所用的小试管是用橡胶塞来做盖子的,因此,在每次进样时,都有一个保留时间固定的干扰峰存在,后经证实,此干扰峰是由甲醇浸泡橡胶塞而溶下的组分所产生,换用玻璃试管后,干扰峰消除。
2、塑料试管的溶解问题。
近年来,一次性塑料试管给试验人员带来了极大的方便,但是,在使用过程中一定要注意有机的溶剂对试管的溶解现象,在利用此种试管提取样品时,有些有的溶剂对管壁有溶解现象,高效液相色谱费用,这些被溶解下来的物质有时也能在检测器上产生信号,从而干扰样品的测定。
这时,可用相同的实验条件先试验一下,看看不含被抽提物时,提取液在检测器上能否产生干扰信号,如确有干扰信号存在,就只能换用耐有机的溶剂的玻璃试管了。
3、被测样品在试管壁上的吸附问题。
高效液相色谱法实验结果分析
现代色谱分析法是有效而快速的分离、分析手段,既可用于定性分析,又可用于定量分析。
高效液相色谱法与气相色谱法的定性分析和定量分析方法(包括测定方式和计算方法)相同。
在定性分析中,有用纯物质对照的色谱鉴定法,高效液相色谱哪家效果好,还有收集馏分与化学方法或其他仪器分析方法联用的非色谱鉴定法;在定量分析中,可以用峰高或峰面积以内标法、外标法或归一化法定量,并与微机联用作为现代化的分析工具。
定性分析
色谱分析法定性分析的目的就是确定每个色谱峰代表什么组分,从而确定由这些组分所构成的混合物试样的组成。
常用的主要定性方法有色谱鉴定法和非色谱鉴定法两种。
1.色谱鉴定法定性
色谱鉴定法就是用纯物质对照定性,这是气相和高效液相色谱法中常用的方便的一种定性方法,可以和定量测定操作同时进行。
(1)利用保留值定性
在色谱条件一定的情况下(包括柱长、柱内径、固定相、柱温、流动相及流速等),每一种物质都有其一定的保留值(包括保留时间、保留体积、调整保留时间、调整保留体积等),一般不受其他组分的影响,可以作为定性的根据。
此法又称为纯物质对照定性。
在相同的色谱条件下,先测定未知物中每个色谱峰的保留时间或保留距离,再将要测的某纯物质注入色谱仪,对照比较两者的保留值,如果两者的保留值相同,就可判定该未知物与已知纯物质是同一种物质。
(2)利用加入纯物质增加峰高法定性
在稳定的色谱条件下,为了区分两个保留值(保留时间或保留距离)非常接近的组分,可以将某纯物质直接加入到试样中,再注入色谱仪,如果某组分峰的峰高增加了,表明这个色谱峰就是加入的纯物质。
此法又称为纯物质追加法定性。
色谱鉴定法定性需要有纯物质对照,在没有纯物质时,可以用非色谱鉴定法定性。
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