在每根光纤的顶部蚀刻出一个小洞,可镶嵌直径为3um的微磁珠。每个微磁珠上可以根据不同的需求连接不同的配体,如寡核苷酸、蛋白质、抗体等。制作芯片时,将带有所需配体的不同微磁珠混合后与光纤束进行自组装,通过微珠上寡核苷酸标签序列(address) 确认每根光线上所吸附的不同的微珠。现有微珠芯片上每束光纤可镶嵌1536种微珠,材料表面羟基化,因此,每种微珠在一束光纤中有30次重复。结合在微珠上的寡核苷酸或者蛋白可与荧光标记的配对核酸或配体发生相互作用,羟基化表面处理,发生的信号被激发后通过光纤传递到检测器。
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目前,由于灵敏度所限,多数方法需要在标记和分析前对样品进行适当程序的扩增,不过也有不少人试图绕过这一问题,如 Mosaic Technologies 公司引入的固相 PCR 方法,引物特异性强,河北表面羟基化,无交叉污染并且省去了液相处理的烦琐; Lynx Therapeutics 公司引入的大规模并行固相法 (Massively parallel solid-phase cloning) ,金属表面羟基化,可在一个样品中同时对数以万计的 DNA 片段进行,且无需单独处理和分离每个。
2)用点样法固定在玻璃板上的DNA探针阵列,通过与荧光标记的靶基因杂交进行检测。这种方法点阵密度可有较大的提高,各个探针在表面上的结合量也比较一致,但在标准化和批量化生产方面仍有不易克服的困难。3)在玻璃等硬质表面上直接合成的寡核苷酸探针阵列,与荧光标记的靶基因杂交进行检测。该方法把微电子光刻技术与DNA化学合成技术相结合,可以使基因芯片的探针密度大大提高,减少试剂的用量,实现标准化和批量化大规模生产,有着十分重要的发展潜力。
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