ELISA试剂盒的发展前景
临床测定技术的发展主要在于方法学的发展,而方法学的发展依托于试剂生产技术不断进步更新和型标记物的应用。
分子生物学正在并肯定会让对整个生命科学有一个的认识,其对测定技术发展的影响也是直接而又有效的,对以些难以检测的生物活性物质的测定,并且大大提高了检测的灵敏度和特异性。
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Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案
显色淡,沙丁胺醇ELISA试剂盒公司,灵敏度偏低
1 试剂盒未充分平衡 试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,兽药残留ELISA试剂盒公司,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)
2 样品不适合做ELISA检测 样品一般选择培养上清、血浆。
其他样品形式可能不适合做ELISA检测或者需要优化检测的条件(例如稀释液的成分)
3 酶标板在贮存或洗后拍干时过分干燥 防止板过于干燥
4 包被遭到破坏 操作温和,移液不能碰到孔底
5 样本和孵育条件不合适 按照说明书条件,建议孵育过程中全程振荡孵育。
6 洗涤浸泡时间过长 按照说明书操作。
勿人为增加浸泡时间;
7 偶联HRP试剂污染 弃去试剂,重新配置
8 错误的稀释偶联HRP试剂 弃去试剂,重新配置
9 TMB底物孵育时间过短,因非人为因素影响,需要优化孵育时间 确定合适的孵育时间:人为判定-高浓度的标准品出现深蓝色;S4-5有淡蓝色;机器判定620 nm波长下测定OD值达到0.6-0.65
10 样本浓度过高或存在基质效应 建议做不同稀释倍数,氯霉素ELISA试剂盒公司,确认样本稀释倍数。
11 滤光片设置有问题或者波长选择不对 确认仪器设置及选择正确的波长检测。
12 酶标板不适合做ELISA 不能使用细胞培养板,建议使用ELISA高吸附力板子。
ELISA试剂盒的试验原理
试剂盒是固相夹心法酶联吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,山东ELISA试剂盒公司,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
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