层析柱的规格
层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。
此外， 直径加大，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。
分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞，一般不超过1米。
分族分离时用短柱，一般凝胶柱长20-30厘米，柱高与直径的比较5:1─10:1，凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。
分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1，常用凝胶柱有50×25厘米，10×25厘米。
层析柱滤板下的死体积应尽可能的小，如果支掌滤板下的死体积大，层析柱厂家，被分离组分之间重新混合的可能性就大，其结果是影响洗脱峰形，出现拖尾出象，降低分辩力。
在分离时，死体积不能超过总床体积的1/1000。
层析柱装柱步骤流程
层析柱装柱步骤流程
1.HETP计算
所用样品为1.0%NaCl或纯溶液，上样大约为总柱床体积的1%。
对于34和50μm的填料，使用的线性流速应为30 cm/h，锦州层析柱，90μm的填料选择20 cm/h的线性流速。
通过下式计算HETP:
HETP = L/N
其中L为柱床高度（cm），N为理论塔板数，N=5.54 (Ve/Wh)2；
Ve为洗脱体积（mL），Wh峰高一半处的峰宽（mL）。
2.峰对称因子计算
洗脱峰的峰形应尽可能对称，即对称因子尽可能接近1。
As按下列公式计算：
As = b/a
其中，a为峰高10%处的前半个峰宽，b为峰高10%处后半个峰宽。
凝胶是一类多孔性高分子聚合物，每个颗粒犹如一个筛子。
当样品溶液通过凝胶柱时，相对分子质量较大的物质由于直径大于凝胶网孔而只能沿着凝胶颗粒间的空隙，随着溶剂流动，层析柱供应，因此流程较短，向前移动速度快而首先流出层析柱；反之，相对分子质量较小的物质由于直径小于凝胶网孔，可自由地进出凝胶颗粒的网孔，在向下移动过程中，它们从凝胶内扩散到胶粒孔隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入与逸出，使流量增长，层析柱价格，移动速率慢而后流出层析柱。
而中等大小的分子，它们也能在凝胶颗粒内外分布，部分进入颗粒，从而在大分子物质与小分子物质之间被洗脱。
这样，经过层析柱，使混合物中的各物质按其分s子大小不同而被分离。
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