事半功倍的不锈钢层析柱使用技巧
聚酰胺色谱的原理:兼具吸附色谱和分配色谱的功能。
采用强极性洗脱剂时主要为吸附色谱——正相色谱;
采用弱极性洗脱剂时主要为分配色谱——反相色谱。
分离对象:能与聚酰胺形成氢键的化合物,如酚类、酸类、醌类、硝基化合物及含羟基、氨基、亚氨基的化合物及腈和醛等类化合物。
聚酰胺在水中吸附能力的规律:
形成氢键的基团(如酚经基、按基、酪基、硝基等)越多,吸附力越强。
如丁二酸>丁酸 形成氢键的位置与吸附力有很大关系。
对位、间位酚羟基使吸附力增大,树脂柱供应,邻位使吸附力减小。
芳香核、共轭双键多者吸附力大,少者吸附力小。
若形成分子内氢键,则使化合物的吸附力减小。
层析柱的应用领域介绍
层析柱是凝胶层析技术中的主体,树脂柱,一般用玻璃管或有机玻璃管。
根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。
层析柱是层析实验的主体,可根据所要分离的样品的大小、性质决定层析柱的直径尺寸和填充物。
应用领域:
1、植物、中药有效成分地分离。
2、中药有效成分地精制。
3、中药中杂质的清除。
4、化工中间体、合成产品的纯化。
5、蛋白纯化、可以适配AKTA等蛋白纯化仪。
层析柱规格介绍
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。
根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。
层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。
此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,树脂柱多少钱,样品稀释度大。
分离度取决于柱高,树脂柱价格,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞,一般不超过1米。
分族分离时用短柱,一般凝胶柱长20-30厘米,柱高与直径的比较5:1─10:1,凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。
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