犬骨桥素(OPN) elisa试剂盒（科研实验专用）操作步骤：
步骤一：使用前将所有试剂平衡至室温并充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫以免加样时加入大量的气泡产生加样上的误差。步骤二：根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
步骤三：【加样】加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37摄氏度温育45分钟。
步骤四：【洗涤】甩去孔内液体，每孔加满洗涤液振荡30秒，甩去洗涤液用吸水纸拍干。重复此操作4次，也可以用洗板机洗涤。
步骤五：每孔加入100ul的HRP轻轻振荡混匀37摄氏度温育30分钟。
步骤六：重复洗涤步骤。
步骤七：每孔加入底物A、B溶液各50ul，轻轻振荡混匀，37摄氏度温育5分钟，避免光照。
步骤八：取出酶标板迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
步骤九：在450nm波长处测定各孔的OD值。
犬骨桥素(OPN) elisa试剂盒技术小提示：当混合或重溶蛋白溶液时，尽量避免起沫；为了避免交叉感染，配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需要更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽；每次孵育时，请正确使用封板胶可保证结果的准确性；混合后的显色底物在上板前应为无色，请避光保存；假如微孔板后，将由物色变成不同深度的蓝色；终止液上板顺序应同显色底物上板顺序一致；加入终止液后，孔内颜色由蓝变黄；若孔内有绿色，则表明孔内液体未混匀；请充分混合。