猪末端补体复合体C5b-9(C5b-9) ELISA试剂盒样本注意事项如下:
1. 【样本保存】收集后若在一周内检测可以保存于2-8℃,若不及时进行检测,请进行分装冻存于-20℃或-80℃。避免反复冻融。
2. 【血清标本采集】应避免溶血,红细胞溶解是会释放出具有过氧化物酶活性的物质,溶血标本可能会增加非特异性显色。
3. 【尿液检测收集和保存】收集尿液的容器必须要清洁干燥,**使用一次性的容器,避免因用药并清洁不到而造成污染。尿液样本必须新鲜,留取后应及时检测或保存。
步骤一: | 从室温平衡60分钟后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。 |
步骤二: | 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50ul。 |
步骤三: | 样本孔中加入待测样本50ul;空白孔不加。 |
步骤四: | 每孔加入生物素标记抗体50ul,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育30分钟;标准孔空白孔不加。 |
步骤五: | 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350ul),静置1分钟,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。 |
步骤六: | 除去空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100ul,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育30分钟。 |
步骤七: | 重复步骤五 |
步骤八: | 每孔加入底物A、B各50ul,37℃避光孵育15分钟。 |
步骤九: | 每孔加入终止液50ul,15分钟内在450nm波长处测定各孔的OD值。 |