化学品溞类急性活动抑制试验
1范围
本标准规定了化学品类急性活动抑制试验的原理、仪器和设备、试验准备、试验程序、质量保证与质量控制、数据与报告。
本标准适用于测试与评价可能暴露于水生生态环境的化学品对类急性活动的抑制作用。
2术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
半数效应浓度(E00)median effective concentration 引起50%的受试活动抑制的受试物浓度。
活动抑制immobilisation
轻晃试验容器,15 s内体不能游动,视为活动受到抑制。
3受试物信息
a) 结构式;
b) 纯度;
c) 水中溶解度;
d)蒸气压;
e)在水中和光中的化学稳定性
f) 正辛醇一水的分配系数;
在水溶液中的可靠的定量分析方法、回收率以及检测限;
快速生物降解性试验结果。
4 原理
幼溞(试验开始时龄小于24 h)以一定的浓度范围暴露于受试物溶液中48 h,相对于空白对照组,观察记录24 h和48 h受试物对类活动抑制情况。通过对结果分析计算48 h的EC50亦可选 24 h的EC50结果。
5参比物
推荐使用****(K2Cr207),其24 hEC50值范围为0· 6 mg/L-2.1 mg/L,参见参考文献[ 1 ]、
6仪器和设备
6 · 1接触到试验溶液的试验容器和其他设备**是全玻璃制品或由其他化学惰性材料制成。试验容器通常为试管或烧杯,每次使用前必须按照标准的实验室程序清洗干净;试验容器应便于加盖,以减少水分蒸发造成的损失,并避免灰尘进人溶液。挥发性物质应在足够大的完全密闭的容器中进行,以免溶解氧受限或过低。
6. 2需用下列部分或全部仪器设备:
一一溶解氧仪(带有微电极或其他能够测定少量样品的溶解氧浓度的适当装置); pH计;
一一一适当的温度控制设备;总有机碳(TOC)测定仪;化学需氧量(COD)测定仪;一一测定水硬度的设备等。
7试验准备
7· 1受试生物
**大型溞,也可用其他溞类。
7· 2试验液
a)选择的试验液浓度一般稀释而成。贮备液将受加人到试验用水中配制而成。应尽量避免使用助、乳化齐口 有时需用这些物质来配制适当浓度的贮备液。有关助溶剂、乳化齐口 剂的准则见参考【4】。任何情况下,受试物的浓度不能超过其在试验用水中的溶解度。
b) 通常不能调节试验液的pH值。如果溶液的pH不在6、9范围内,调节贮备液的pH值同时进行第二套试验。调节pH值可以使用HCI或NaOH,但必须保证贮备液的性质、浓度不发生改变,即不发生化学反应或沉淀作用。
8质量保证与质量控制
对照组(包括空白对照组和溶剂对照 抑制率不能超过10%;其受抑制情况包括:活动受抑制、有疾病症状或受损伤,例如变色、行为异常(如飘浮于液面)等。
试验结束时对照组和试验组的溶解氧浓度应不小于3 mg/L。
9数据与报告
9· 1数据
以表格形式列出24 h和48 h对照组和各试验组试验溢数、活动受抑制数及百分率。以24 h 和48 h抑制百分率与受试物浓度作剂量-效应曲线,选择合适的统计方法(如概率单位法)计算 24 h EC50(可选)和48 h EC50及其95%的置信区间。
当获得的数据使用标准的方法无法统计时,无抑制作用的*高浓度和引起100%抑制的*低浓度可用于推导EC50(可以认为其为两者浓度的几何平均值)。
9· 2试验报告
试验报告应包括以下内容:
9 · 2· 1受试物
a)物理属性和相关理化性质;
b)化学标识鉴别数据,包括纯度。
9 · 2· 2受试生物
类的来源和种类,提供者(若已知),培养条件(包括食物的种类、来源、喂食量以及喂食频率)。
9 · 2· 3试验条件
试验容器:试验容器的类型与体积,试验液的体积,每个容器中溞类的数量,每个浓度的平行数;
储备液和试验液制备的方法,包括助溶剂、分散剂和乳化剂的使用及其浓度;
试验用水:来源和水质特征。若使用重组水,应提供其组成和制备方法;
培养条件:温度、光照强度、光照周期、溶解氧、PH值等;
9 · 2·4 结果
各观察时间点内,对照组和试验组中溞类活动受抑制或行为异常的数量和百分数;
参比物的实验结果;
每个容器中受试物的配置浓度和所以分析测定受试物浓度的结果,分析方法的回收率和检测限;
试验期间水质测定结果,包括温度、PH值、溶解氧等;
24 h EC50(可选)和48 h EC50及其95%的置信区间,以及剂量-效应曲线及其标准误差。用于计算EC50的统计程序;
若出现偏离,需说明偏离及其对试验结果的影响。