人甲基CpG结合蛋白2(MECP2) ELISA试剂盒技术提示: 1、混合蛋白溶液时,避免起泡。 2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样, 避免交叉污染。 3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。 4、使用自动洗板机时,加入一个 30 秒浸泡的步骤,可以提高检测精度。 5、底物溶液为无色液体,保存过程中变为蓝色,代表底物溶液已经失效,不得使用。 6、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致,加入终止液后,蓝色底物产物,会瞬间变为黄 色。 7、实验中,用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 8、所有液体组分,使用前充分摇匀,严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温 育操作。
上海轩泽康生物有限公司产品订购单 | ||||
编号 | 名称 | 规格 | 检测方法 | 价格 |
1 | 人甲基CpG结合蛋白2(MECP2) ELISA试剂盒 | 96T/48T | ELISA | 电讯 |
上海轩泽康生物ELISA试剂盒技术指南:【关于ELISA试验的稳定性问题】
1. 做ELISA实验时,结果老是重复性不上,相同的材料和相同的操作方法做出的结果就截然不同,上午做时OD在1.5,下午做时就是0.9了,所以都没有办法下结论,为什么会差异这么大呀?答:(1)多设平行空孔;请别人代劳,以判断究竟是否操作问题。(2)对于活性非常高的包被物和酶标记物,如果第、一次选择的范围恰好在其平台位置边缘。那么在重复的时候每次取样带来的微量误差就很容易导致大的偏差了。特别时线性比较好的原料试剂,这个就很正常了。建议每次取样的时候只使枪尖一点点位于液面下,以免吸嘴外面沾有少量抗原或者抗体或酶而使结果重复不上。
2. 酶不稳定,有何高招?答:(1)保存浓度尽量高些。(2)另外可以添加牛血清蛋白等蛋白保护剂,以避免其被吸附或沉降以及被蛋白酶所降解。(3)加入50%甘油-20℃保存,避免反复冻融。(4)还可以加入防腐剂防止长菌(注意不能使用叠氮钠,其对HRP活性有很大影响。(5)现在一些公司也有商品化的酶标保护剂供应,可以考虑一下。酶类的稳定性与保存方法有很大的关系。干燥的制品一般比较稳定,在低温情况下其活性可在数日甚至数年无明显变化,贮藏要求简单,只要将干燥的样品置于干燥器内(内装有干燥剂)密封,保持0-4℃冰箱即可。液态稳定性较差,贮藏时应注意以下几点:1.样品不能太稀,必须浓缩到一定浓度才能封装贮藏,样品太稀易降解、变性。2.一般需加入防腐剂和稳定剂,酶常用的稳定剂有硫酸铵糊、蔗糖、甘油等,也可加入底物和辅酶以提高其稳定性。此外,钙、锌、硼酸等溶液对某些酶也有一定保护作用。3.贮藏温度要求低,避免反复冻融。