乙酰化修饰是一种可逆的高度保守的蛋白翻译后修饰,常发生于组蛋白和非组蛋白,对基因表达、转录调控因子活性、细胞代谢通路以及代谢酶活性具有重要的调控作用。WB(Western blotting)即免疫印迹或称蛋白印迹法,是根据抗原抗体特异性结合的原理发展起来的,将凝胶电泳技术与免疫化学技术相结合的免疫生化技术,用于检测复杂样品中的某种蛋白,并能对其进行定性和半定量分析。
乙酰化蛋白WB就是利用免疫印迹技术对乙酰化蛋白进行检测,大致实验流程是将经PAGE分离的蛋白样品转移到固相载体上,固相载体上的蛋白质作为抗原与对应的抗体(一抗)发生免疫结合,再与特殊标记的二抗特异性结合,Z_U_I后利用底物显色或放射自显影技术对其进行检测,即可对乙酰化蛋白进行定性鉴定。
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