人过氧化还原酶2(PRDX2) ELISA试剂盒操作程序: 所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。 仅供科研使用,不得用于临床诊断。1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。 2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。 设置标准品孔、0 值孔、空白孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL,0 值 孔加样本稀释液 50μL,空白孔不加,样本孔加待测样本 50μL。 3、除空白孔外,标准品孔、0 值孔和样本孔,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100μL。 4、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 60min。 5、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 20S,甩去洗涤液,吸水 纸上拍干,如此重复 5 次。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡 30s 的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分 拍干反应板。 6、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反 应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 15min。 7、所有孔加入终止液 50μL,在酶标仪上读取各孔吸光度(OD 值)
1)间接法:测定总抗体或IgG抗体
2)抗体夹心法:测定二价或二价以上大分子抗原
3)抗原夹心法:测定抗体
4)抗体竞争法:测定抗体
5)抗原竞争法:测定只有一个抗原决定簇的小分子半抗原
6)捕获包被法:测定IgM,传染病的早期诊断