21世纪初考古学家发掘的新石器时代文物表明，伊斯坦布尔所在的半岛早在公元前7000纪即有人定居[32]。这一定居点对于新石器革命由近东传播至欧洲产生十分重要的作用；其存在了近一千年，直至被上涨的水面淹没[33]。在此考古发现之前，传统认为色雷斯人，包括弗里吉亚人，在公元前6000纪末开始定居于萨拉基里奥角[19]。亚洲部分，在今卡德柯伊区出土了近公元前4000纪前的文物[34]。这一地点亦是公元前1000纪腓尼基贸易点的所在地，亦是于公元前约680年建立的迦克墩的所在地[a]。
公元前660年[35][a]，来自墨伽拉的希腊殖民者于博斯普鲁斯海峡的欧洲一侧建立了拜占庭，伊斯坦布尔的历史被认为在此时才正式开始。殖民者在金角湾色雷斯人定居点附近建起了卫城，推动了新城经济的发展[36]。拜占庭于前5世纪之交经历了短暂的波斯统治，但在波希战争后希腊人夺回了这座城市[37]。它此后成为雅典同盟及其继承者雅典第二帝国的一部分，在前355年最终获得独立[38]。拜占庭长期为罗马盟友，而在公元73年正式成为罗马帝国的一部分[39]。
拜占庭在篡位者佩斯切尼乌斯·奈哲尔与罗马皇帝塞普蒂米乌斯·塞维鲁的战争中支持前者，为此付出了惨重的代价；在195年末投降时，两年的围城已几乎将之摧毁[40]。在五年之后，塞维鲁开始重建拜占庭，拜占庭也恢复了甚至超越了其过往的荣光
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