没食子酸(Gallicacid,GA)3,4,5-三羟基苯甲酸一水合物,药典将没食子酸作为五倍子、拳参、地榆、余甘子等中药材的有效活性成分,具有显著的抗氧化功效。外观上白色或淡黄色结晶或结晶性粉末。在热水、甲醇、乙醇或丙酮中易溶,在水或**中微溶,在苯、三氯甲烷或石油醚中几乎不溶,作为重要的精细化学品,在生物、医药、化工等领域有广泛应用,有良好的发展前景。
近年来,国内外研究者开发了许多没食子酸的检测方法,这些方法在灵敏度、稳定性等方面各具特色,包括薄层扫描法、高效液相色谱法、液相-质谱联用、气相色谱-质谱联用、近红外光谱法、差示分光光度法等,可以区分为基于液相色谱和气相色谱,按照不同的检测需求,与不同检测器联用的色谱法,和基于物质与辐射能作用时,分子发生能级跃迁而产生的发射、吸收或散射的光波长或强度进行分析的光谱法。
药典收载种没食子酸照高效液相色谱法(通则0512)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.05%磷酸溶液-甲醇(93:7)为流动相;检测波长为271nm。理论板数按没食子酸峰计算不低于4000。
测定法取本品约0.1g,精密称定,置100ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含20μg的溶液,用孔径为0.45μm的滤膜滤过,弃去初滤液5ml,取续滤液作为供试品溶液,精密量取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另取没食子酸对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含20μg的溶液,同法测定。按外标法以峰面积计算,即得。
实验室查阅文献资料分享一种另一种利用高效液相色谱联用质谱,检测没食子酸含量的相关方法,测试液相色谱条件:Waters色谱柱(2.1mm×50mm,1.7μm),柱温30℃,流量0.3mL/min,进样量10μL,流动相A为0.1%甲酸水溶液,B为甲醇;梯度洗脱,质谱条件电喷雾负离子源ESI(-),离子源温度120℃,毛细管电压3.0kV,RF透镜电压0.5V,脱溶剂温度300℃,脱溶剂气流量600L/h,锥孔气流量50L/h,多反应监测模式(MRM)该方法也能够快速简便、灵敏度高、重现性好对样品中的没食子酸进行定性与定量分析。
实验室可以利用高效液相色谱(HPLC)等方法,高效的检测送样品中没食子酸的含量变化。拥有气相色谱仪、液相色谱仪、高分辨液质、液质三重四级杆、气质质、扫描电镜、透射电镜、核磁、二次离子质谱等分析仪器等多类检测设备仪器,遵ISO17025和GMP等高标准进行管理,为生物医药领域伙伴产品生产过程中可能产生的杂质提供评估报告、方法开发、验证及样品检测等一系列完整的解决方案。