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交联蛋白组学分析
2023-12-15 11:46  浏览:12
交联蛋白组学分析

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交联蛋白质组学分析利用交联法进行蛋白质组学研究,主要用于解决蛋白质相互作用研究中的问题,交联法依托交联剂在两个或多个蛋白质特定氨基酸残基之间形成化学键而将相互作用的蛋白质紧密结合在一起,可以维持蛋白质间的相互作用,捕获微弱、短暂的相互作用的蛋白质

根据反应进行的场所和交联剂的类型可将交联法分为体内和体外交联、同源和异源以及光敏交联。体内交联反应在细胞内进行,有利于保持蛋白活性,且在一定程度上避免了假阳性;体外交联是指在细胞裂解液或蛋白样品中进行交联反应,脱离了细胞内环境的控制,体外交联可以选择的交联剂类型更多,也更适合于发现较稳定的蛋白-蛋白相互作用。同源交联剂具有两个相同活化反应基团,能识别蛋白质上相同的官能基团;异源交联剂具有不同得反应基团,可以识别不同的蛋白官能基团;光敏交联剂同时具有化学交联基团和光敏交联基团,光敏基团只对紫外线发生响应,通过先交联热不稳定活性基团再紫外交联第二个蛋白基团这两步反应实现相互作用蛋白的交联。

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