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人抗杀菌通透性增高蛋白抗体(BPIAb)ELISA试剂盒操作步骤:
1) 将标准品工作液依此加入到前两列孔中,每个浓度的工作液并列加两孔,每孔100ul.待测样品加入到其他孔,每孔100ul(若样本浓度高于检测范围,需要用标准品&样本稀释液稀释后取样)。给酶标板覆膜,37℃孵育90分钟。
2) 弃去液体,甩干,不用洗涤。每个孔中立即应加入生物素化抗体/抗原工作液100ul,混匀,酶标板加上覆膜,37℃孵育1小时。
3) 甩尽孔内液体,每孔加洗涤液350ul,浸泡1-2分钟,吸取或甩掉酶标板内的液体,再厚的吸水纸上拍干。如此重复洗板步骤3次。
4) 弃去孔内液体,洗板5次,方法步骤同3。
5) 每孔加底物溶液(TMB)90ul,混匀,加上覆膜,37℃避光孵育15分钟左右。
6) 每孔加终止液50ul,终止反应。