蛋白糖是指发生了糖基化修饰的蛋白质,也称糖蛋白。蛋白糖检测主要就是鉴定一个蛋白质是否发生了糖基化修饰。
糖蛋白检测可以通过分离富集糖基化蛋白质的技术来实现,如凝集素亲和技术、肼化学富集法以及凝胶色谱技术等。
凝集素可以专一性识别并结合某一特异性的单糖或寡糖中特定的糖基序列。含糖蛋白的蛋白质样品或经酶切的聚糖肽可以按照顺序通过多种凝集素亲和色谱柱,从而筛选出不同的聚糖蛋白或聚糖肽,用于后续的检测分析。
肼化学富集法利用高氯酸盐将糖基上的邻二醇氧化成醛,醛基能与固定在树脂上的肼共价结合,经过洗脱程序,富集在树脂上的蛋白质就是发生了糖基化。
凝胶色谱法通过利用凝集素或抗体亲和技术使糖蛋白带上相应标记,再通过色谱柱进行洗脱富集。色谱法基于其快速、准确、分辨率高且稳定性好等特点,已成为糖蛋白鉴定的理想技术。
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