类型 : | 其他生物化工 |
苯基-琼脂糖凝胶FF
(Phenyl-Berpharose FF)
1.产品介绍
苯基-琼脂糖凝胶FF是一种将苯基键合在琼脂糖凝胶微球上形成的较强疏水性疏水层
析分离介质。
该产品保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架结构,与生物活性大分子有很好
的相容性,具有载量高、非特异性吸附少、流速快等特点,广泛用于具有一定疏水性能的
蛋白质、多肽等生物大分子的实验室规模制备和生物制药、生物工程的工业化制备,例如:
重组人粒巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、人集落刺
激因子(M-CSF)、表皮生成因子(EGF)的生产以及单克隆抗体的纯化。
2.规格
1ml(预装柱)、5ml(预装柱)、10ml(预装柱)、20ml、100ml、500ml
3.产品性能
性能 | 指标 |
基质 | 6%琼脂糖微球 |
配体 | 苯基(C6H5) |
配体密度 | 25μmol/ml |
载量 | 约50mg BSA/ml |
粒径 | 45~165μm |
推荐流速/最大流速 | 100/700 cm/h |
耐反压 | 0.3MPa |
工作温度 | 4~40℃ |
耐热 | PH7.0水中,120℃灭菌30min |
pH稳定范围:长时间/短时间 | 3~13/2~14 |
储存缓冲液 | 20%乙醇 |
储存温度 | 4-8℃ |
4.使用方法
①平衡:用2~5个柱体积的初始缓冲溶液进行平衡,建议流速为100 cm/h。
观察检测器的变化,直到电导率、pH值等参数不变。
②上样:样品的预处理:样品需用0.45μm滤膜过滤,在上样,以免堵塞层析柱。
上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,也可通过线性实验找到上样量。
③淋洗:用2~3个柱体积的平衡缓冲液进行淋洗,观察检测器的变化,直到电导率、pH值等参数基本不变。
④洗脱:疏水层析柱的洗脱可用恒定洗脱、梯度洗脱或者阶跃洗脱。
一般推荐使用降低盐浓度的梯度洗脱,亦可根据实际情况添加有机溶剂进行洗脱。
5.再生、清洗、保存
①凝胶再生
(1)用蒸馏水按操作流速冲洗3~5个柱体积,接着用平衡液清洗3~5个柱体积。
(2)再生时若有失活蛋白质或脂类物质洗不掉,可用在位清洗法除去。
②在位清洗
(1)去除强结合的蛋白质或脂类物质:1 M NaOH洗2个柱体积,8 M尿素洗2个柱体积, 30%异丙醇洗2个柱体积,平衡缓冲液洗2个柱体积。
(2)去除内毒素热原:1 M NaOH清洗1~2 h,速度50 cm/h。
(3)在位清洗可有效去除介质上的杂质,反向清洗效果更佳
6. 注意事项:
1) 使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。
2) 在常用水相缓冲液、1M NaOH、8M 尿素、6M 盐酸胍、70%乙醇中稳定
3) 本产品保存条件为20%乙醇,4~8℃。
4)2-25℃,常压,避光运输
5)仅供科研实验使用