酵母双杂交技术服务 迈斯普公司

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武汉迈斯普生物科技有限公司
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武汉迈斯普生物科技有限公司是一家专业从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。
公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士领衔创办。
公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。
现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向全国提供优质的生物技术服务。


其基本原理是:在细胞或组织结构保持不变的条件下,用标记的已知的RNA核苷酸片段,按核酸杂交中碱基配对原则,与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合(杂交),所形成的杂交体 (Hybrids)经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的mRNA、rRNA和tRNA分子。
RNA原位杂交技术 经不断改进,其应用的领域已远超出DNA原位杂交技术。

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双杂交系统的建立得力于对真核生物调控转录起始过程的认识。
细胞起始基因转录需要有反式转录因子的参与。
80年代的工作表明, 转录因子在结构上是组件式的(modular), 即这些因子往往由两个或两个以上相互独立的结构域构成,其中有DNA结合结构域(DNA binding domain,简称为BD)和转录结构域(activation domain,简称为AD),它们是转录因子发挥功能所必需的。

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应用:酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性。
主要是由于:①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达。
②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度。
③杂交蛋白间稳定度可被结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合,酵母双杂交技术服务, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定。
④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大。
同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感。

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发布时间
2020-05-21 13:04
所属行业
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编号
23623156
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