酶底物法测定总大肠菌群的影响因素
环境因素的影响
对同一水样在自然环境下与无菌室中分别进行总大肠菌群和大肠埃希氏菌检测， 培养时间为 24 h，培养温度为( 36 ± 1) ℃ ，水样在自然环境下与无菌室内总大肠菌群和大肠埃希氏菌的检测值相对偏差在 10% 以内，样品T检验分析p＞0．05，监测值差异不显著，表明此方法对实验环境是否无菌没有严格的要求。
大肠杆菌检测：
气相色谱法主要是将大肠杆菌经过一系列衍生化的前处理后，为接下来的分析研究提供尽可能多的化学组分。大肠杆菌的污染程度可以用顶空气相色谱法来分析，其原理是利用食品密封系统顶部的微生物代谢产物CO2对微生物进行分析。这种方法对食品质量安全检测有重大意义。与上述传统技术相比，此种方法具有检测速度快、灵敏度高的优点。
gao效液相色谱法（HPLC）主要是根据离子配对反相层析的原理来分析核酸。在长链DNA所携带的磷酸基团比较多，天津酶底物法封口机，因此会有更多的TEAA与之相融合，其在柱内停留的时间增加。因为yi腈具有亲水性，可以通过其而将DNA分离，在具备一定的变性温度下，可以通过图谱显示明显的吸收峰。该技术具有准确度高、灵敏度高、成本低等优点，可大大提高工作效率。
水中粪大肠菌群的常见检测方法
1、纸片法
采用纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过粪大肠菌群在上面的生长、显色来测定的方法，即粪大肠菌在纸片培养基上呈红色菌落，菌落周围产生黄圈是粪大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。
2、酶底物法
将加入酶底物检测试剂的100ml水样注入51孔或97孔的定量测量盘中进行密封后培养，由于大肠菌群细菌能产生一种β-半乳糖苷酶分解PG使得培养液呈黄色，同时大肠埃希氏菌可以产生葡萄糖醛酸酶分解MUG，培养液将会在波长366nm紫外光下产生荧光反应。通过计算有黄色反应和荧光反应的孔穴数，可对照MPN表查出其代表的粪大肠菌群可能数水中粪大肠菌群。
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