阻断cAMP的运行,cGMP assaykit,使得β-类shen上腺激l素受体增加而用于治l疗心率不齐、高血l压、心肌埂塞和心力l衰竭。针对cAMP的特定Ⅱ型和Ⅳ 型腺苷酸环化酶的抑制l剂,正在进行增强认知方面的临床测试。因此为筛选出腺苷酸环化酶激l活剂或磷酸二酯酶抑制l剂,需要一个高敏感度、特异性的、可重复的方案用于检测 cAMP的浓度。
武汉纽斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美国生命科学试剂供应商美国NewEastBio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA试剂盒、蛋白等,与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系,产品销往全球。
标准品制备
用1.0 mL通用稀释液重新配制标准溶液,在室内保存10分钟
温度,轻轻摇动(不要起泡)。标准品在原料中的浓度
溶液为20 ng/mL。请准备7支含有0.5 mL通用稀释剂的试管
根据下图制作一个双稀释系列。混合每根管子
在下一次转移之前彻底检查。设置7点稀释标准,如20 ng/mL、10 ng/mL、5 ng/mL、2.5 ng/mL、1.25 ng/mL、0.62 ng/mL、0.31 ng/mL,zui后一根EP管
采用通用稀释剂,空白值为0 ng/ml。
对于生长的组织培养液中的细胞,首先移除培养基,然后加入0.1M HCl处理细胞。孵育10分钟并观察细胞是否被裂解;如果裂解不充分,接着孵育10分钟并观察。以大于600g离心力于室温离心,收集上清直接用于实验。临用前在0.1M HCl中加入0.1%至1%浓度的Triton-x 100可增强细胞和组织裂解。在这个浓度范围内,去污剂并不干扰试验的结合部位,但是会适度的增加光密度值。含有Triton的样品需利用标准曲线估计浓度,为了较精l确的测定,标准曲线需以相同方式稀释。取1 mL细胞培养上清加入10μL浓盐酸,600g离心力于室温离心,上清液直接用于实验测定分析。
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