常用的是40孔聚凹孔板。
不管何种载体,青海检测试剂盒,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被(或抗原)的选择:将(或抗原)吸附在固相载体表面时,检测试剂盒厂家,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。
吸附温度,生化检测试剂盒,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。
蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。
选择OD值而蛋白量少的浓度。
对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
酶标记工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记部份)。
然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
终止液(3M H2SO4):蒸馏水178.3ml,逐滴加入(98%)21.7ml。
(5) 底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml加蒸馏水50ml。
(6) TMB(四)使用液:TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml底物缓冲液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl(7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg底物缓冲液(PH5.5) 1ml3%H2O2 2μl(8) 抗原、和酶标记。
(9) 正常人和阳性对照。
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