智立中特生物SPC-A-1人肺腺癌细胞

智立中特生物SPC-A-1人肺腺癌细胞

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智立中特(武汉)生物科技有限公司
联系人
肖素素(女士)
职位
经理
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400-009-7996
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18907133396
微信
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品牌
智立中特生物
产品型号
zl-073203
产品规格
1×10⁶cells/T25培养瓶
发货
3天内

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  细胞名称:SPC-A-1人肺腺癌细胞


  描述:这株细胞源自一位男性肺腺癌患者。


  动物种别:人


  性别:男


  组织来源:肺癌


  形态:上皮细胞样


  培养基和添加剂:RPMI-1640(GIBCO,货号31800022,添加NaHCO3 1.5g/L,glucose 2.5g/L,Sodium Pyruvate 0.11g/L),90%;胎牛血清,10%。气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。


  供应限制:A。仅供研究之用。


  REFERENCE:Tumor(Shanghai)1:255,1981.Chinese Journal of Cancer 21(11):1117-1121,2002 Tumor 22(1):2-4,2002 Chin J Lung Cancer 5(2):123-125,2002 Chin J Immunol 18(9):618-620,2002 China J Cancer Prev Treat 9(3):249-251,2002 Immunological Journal 18(4):299-302,2002 Acta Biochimica et Biophysica Sinica 35(6):548-553,2003 Tumor 23(3):194-196,2003 Chinese Journal of Cancer 22(2):171-174,2003 Journal of Shandong University(Health Sciences)41(3):235-237,2003


  SPC-A-1人肺腺癌细胞接受后处理


  1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。


  2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。


  3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。


  4)如果细胞密度达80%-90%请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。


  5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。


  SPC-A-1人肺腺癌细胞培养操作


  1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。


  2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


  1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。


  2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。


  3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。


  4.将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。


  3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为类;


  1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。


  2.4 min 1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。


  3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。


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232
发布时间
2022-10-14 18:30
所属行业
其他生物化工
编号
30273504
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