过去多数采用目测方法,报出的结果缺乏科学的依据。
例如:某弓形虫检测试剂盒中,酶标仪,临界值规定为:阴性对照品的OD值×2.5,通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。
肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行,但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。
激发波长至少涵盖250-1000nm完整连续波段,适合绝大多数荧光染料,如Cy3、FITC、TRITC、PE、PI、GFP、DAPI、Cy5、Cy7及近红外染料等; 至少配备6块单波段激发滤光片,激发波长分别为360nm, 488nm, 550nm, 630nm, 710nm, 780nm; 至少配备6块单波段发射滤光片,酶标仪型号,发射波长分别为450nm, 525nm, 570nm, 670nm, 805nm, 830nm; 同步完成96孔板斑点图像采集与计数需≤2 min ,每孔图像扫描和计数速度≤1.4sec; 具备自动斑点大小、斑点边缘识别以及融合斑点切割功能; 每个荧光通道分别成像,应用图像原位融合(Overlay)技术,将多副单色荧光图像叠加,保证共分泌细胞荧光斑点识别的准确性。
纤维素膜和醋酸纤维素膜具有很强的静电吸附力,在中性条件下即可有效地吸附蛋白质等生物大分子。
因而,将抗原吸附于纤维素膜后,就可利用纤维素膜作为固相进行抗原反应。
当加入后(即可与膜上的抗原结合,犎;后再加入带有标记物的,使标记通过抗和相应的结合间接地交联于纤维素膜上。
加入标记物相应的底物后,酶标仪报价,标记物即可与底物作用形成不溶性产物,呈现斑点状着色,全波长酶标仪,从而判定结果。
根据所用的标记物不同,可分为:辣根过氧化物酶免疫斑点试验(使用辣根过氧化物酶作为抗的标记物),碱性磷酸酶免疫斑点试验(使用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶复合物作为酶标记物)和金银染色免疫斑点试验(使用胶体金作为抗的标记物)等。
其中,常用的是以辣根过氧化物酶标记系统为基础的免疫斑点试验。
下面以辣根过氧化物酶免疫斑点试验和碱性磷酸酶免疫斑点试验为例作一简单介绍。
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