流行性出血热抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
使 用 说 明（96T/48T）
[原理]
本试剂盒采用亲和素-生物素化EHF核蛋白抗原预包被板ELISA 原理，检测人血清/血浆中存在的EHF-IgG抗体。配以酶标记抗人IgG单克隆抗体作为标记物，加入底物TMB显色后终止反应，在450nm波长测各孔O.D值，O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高是本试剂含有的独特优点。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中存在的EHF-IgG抗体。对肾病综合症出血热（HFRS）的诊断有重要的临床价值。IgG抗体在发热后第3-4天出现，第10-14天达高峰，并可持续多年，具有流行病学调查意义。
适应范围：
流行地区EHF病毒的诊断。
EHF病毒的流行病学调查和疫情监测。
[试剂盒组成]
1、生物素化抗原预包被板 1块（96T/48T）
2、阴性对照 1支（直接使用）
3、阳性对照 1支（直接使用）
4、标本稀释液 1瓶
5、酶结合物 1瓶（直接使用）
6、30X浓缩洗液
1瓶（20/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）
7、显示剂A、B液 各1瓶
8、终止液（2M H2SO4） 1瓶
9、说明书 1张
[操作步骤]
1. 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。
2. 加样：将待检标本用标本稀释液1：41稀释 （5ul—200ul），于反应板中加稀释好的待检标本及阴阳性对照各100ul/孔，设空白对照一孔（加100ul标本稀释液），轻拍混匀。
3. 37℃温育30分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。
4. 加酶结合物：每孔2滴，混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。
5. 显色：每孔加显色剂A、B各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。
[结果判断]
1. 目测：在白色背景下观察各孔显色情况，蓝色者为阳性，无色者为阴性。
2. 酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm下测定各孔O.D值。
S/N=标本O.D值/ 阴性对照O.D值。
S/N≥2.1为阳性；
1.5≤S/N<2.1为可疑标本; S/N<1.5为阴 性。
④ 阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。
⑤ 阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。
[注意事项]
1. 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。
2. 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。
3. 洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。
4. 试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。
5. 避免用溶血、混浊或脂血标本。
6. **用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。