检测技术服务:HCP定量质谱--检测技术服务详情
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当前已开发出多种互补的分析用于监测宿主细胞蛋白(HCP),包括1D/2D-PAGE、基于质谱(MS)的分析技术等。如通过二维液质联用(2D-LC-MS)识别潜在的残留HCP,可以开发出基于目标的多反应监测(MRM)-LC-MS的方法来量化原液中的多个HCP。
DDA蛋白质组学:采用数据依赖性采集模式(Data Dependent Acquisition,DDA)进行较高浓度的HCP检测,可以鉴定到上千个蛋白,建立数据库,同时可以得到HCP特异性肽段的离子对信息;在下游纯化阶段对较低浓度的HCP采用数据非依赖性SWATH的采集模式,可以获得低浓度HCP的定量信息,同时还可以根据HCP的特异性肽段的离子对信息,追踪特异性HCP在不同纯化阶段的浓度变化情况。
PRM蛋白质组学:平行反应监测技术(Parallel Reaction Monitoring,PRM)是一种基于高分辨、高精度质谱的靶向蛋白质组学技术,能够对目标蛋白质和目标肽段进行选择性检测,从而实现对目标蛋白质/肽段进行jué对定量。将直接消化的目的蛋白样品注入质谱仪耦联的zhongji液相色谱仪系统,以C18柱分离消化的肽。
然而,基于MS的方法应用中的zuì大挑战在于,通常HCP浓度较目的蛋白低6个及以上的数量级,而质谱仪本身缺乏从高浓度目的蛋白中鉴定和检测低浓度HCP的能力。为了克服低ppm水平HCP和高浓度治疗性蛋白之间存在较大动态浓度范围的问题,一般可采用两种策略:一种策略为在质谱分析之前增加2D-LC和(或)离子迁移率等额外的分离方法,去除可与目的产物共洗脱的多肽,并辅以数据依赖性采集或非数据依赖性采集来提高分离效率。不过,2D-LC的循环时间可能很长,该方法对小于10 ppm的低水平HCP不够敏感。另一策略主要聚焦于样品制备过程,通过使用亲和纯化、有限消化等方法去除样品中的目的产物,或通过使用多克隆抗体捕获和富集HCP。
百泰派克生物科技提供生物制药分析服务,其中包括宿主蛋白残留(HCP)分析服务。百泰派克生物科技具有经验丰富的技术人员,可以提供从实验设计、样品检测、数据分析等全套专业服务,可精准检测生物药物可能残留的宿主蛋白。
百泰派克生物科技-生物药物表征,生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。
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