USB 2.0 还引入了USB On-the-Go，它提供了两个设备交互的能力，而无需单独的 USB 主机。到目前为止，USB 连接始终位于主机(计算机)和外围设备(鼠标、键盘、音乐设备等)之间。
在物理连接器标准方面，USB 2.0 与 USB Type A、B 和 C 连接器以及 Mini 和 Micro A 和 B 兼容。然而，Micro A&B 和 Type C 的物理连接器是在多年后推出的分别是 2007 年和 2014 年。
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