蛋白质谱几种方法比较

蛋白质谱几种方法比较

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质谱技术将样品分子电离成离子,通过检测离子的质荷比等质谱信息实现样品的定性和定量等鉴定,是蛋白质组学研究的重要工具,不仅可以鉴定蛋白质的分子质量、含量和氨基酸序列,还可以检测蛋白质翻译后修饰情况。在分析蛋白质的分子质量或氨基酸序列时进行单级质谱就足够了;若要对蛋白质翻译后修饰情况进行表征,则还需要选择特殊离子通过碰撞池进行裂解分析,即串联质谱分析。质谱仪主要由离子源、质量分析器和离子检测器3个核心部分组成。离子源的作用是将样品分子电离成离子,质量分析器根据离子的质荷比不同来分离离子,然后利用离子检测器进行检测。随着生命科学技术的发展,目前已涌现了多种不同的质谱电离技术和质量分析器,它们在物理原理、性能参数、操作模式以及适用性等方面都各具特色。

1-.不同电离方式比较:

电离方式

检测化合物类型

进样形式

主要特点

电子轰击电离(EI)

小分子、低极性、易挥发

GC或液体/固体

吸附于探针

硬电离,重现性高,结构信息多

化学电离(CI)

小分子、中低极性、易挥发

GC或液体/固体

吸附于探针

软电离,提供分子离子信息

电喷雾电离(ESI)

小分子、蛋白质、多肽、非易挥发

液相色谱或直接注射样品溶液

软电离,多电荷离子

快原子轰击电离(FAB)

碳水化合物、有机金属化合物、蛋白质、非挥发性

样本溶于粘稠基质中

软电离,比ESI和MALDI硬

基质辅助激光解吸电离(MALDI)

多肽、蛋白质、核酸

样本与固体基质混合

软电离,适合高分子化合物

二、不同质量分析器比较

类型

测定参数

质量范围

分辨率

特点

四级杆

质量/电荷

m/z3000

2000

适合电喷雾,易于正负离子模式切换,体积小,价格低

离子阱

频率

m/z2000

1500

体积小,中等分辨率,设计简单,价格低,适合多级质谱,易于正负离子模式切换

磁场

运动/电荷

m/z2000

10000

分辨率高,分子量测试准确,中等测试范围

飞行时间

飞行时间

m/z∞

15000

质量范围宽,扫描速度快,设计简单

傅立叶变换离子回旋共振

频率

m/z10000

30000

高分辨率,适合多级质谱,需要高真空和超导磁体

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北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。


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41
发布时间
2023-12-19 10:46
所属行业
材料检测与分析
编号
40894634
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