蛋白电泳样品的浓缩效应
1:凝胶孔径的不连续性:
浓缩胶为大孔胶;分离胶为小孔胶。在电场作用下,样品颗粒在
大孔胶中泳动的阻力小,移动速度快;当进入小孔胶时,受到的阻
力大,移动速度减慢。因而在两层凝胶交界处,样品迁移受阻而压
缩成很窄的区带。
2: 电位梯度的不连续性:
电泳开始后,快离子的快速移动会在其后形成一个离子强度很低 的低电导区,使局部电位梯度增加,将蛋白质浓缩成狭窄的区带
大多数蛋白质在pH6.7或8.3时均带负电荷,在电场中,都向正极移动。以上内容由北京龙方科技为您提供,希望对朋友们有所帮助!
影响电泳快慢的重要因素
影响电泳实验泳动速度的重要因素——支持物
电泳实验多在固体支持物上进行,使样品中的不同组分形成不同的区带,称区带电泳。电泳结束后,支持物可以方便地进行染色等后续处理。
对支持物的一般要求是均匀,吸附力和电渗小,机械性能好,甘肃小型转印电泳槽,便于染色或紫外光下检测。常用支持物有SDS——PAGE凝胶,琼脂糖凝胶、滤纸,醋酸纤维素薄膜等 , 支持物性质不同也会影响泳动速率,如琼脂糖和聚酰胺凝胶都有大小不同的筛孔,在筛孔大的凝胶中溶质颗粒的泳动速率快,小型转印电泳槽公司,反之则慢。
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蛋白质进行PAGE时,常用垂直板电泳。
垂直板电泳的优越性有:
a.表面积大而薄,便于通冷却水以降低热效应,条带更清晰。
b.在同一块胶板上可同时进行10个以上样品的电泳,便于在同一条件下比较分析鉴定,还可用于印迹转移电泳及自显影。
c.胶板制作方便,易剥离,样品用量少,分辨率高,不仅可用于分析,还可用于制备。
d.胶板薄而透明,电泳染色后可制成干板,便于长期保存与扫描。
e.可进行双向电泳。
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