转印电泳湿转方式的操作介绍
湿转(一般是恒压转印,100V,时间2h左右):转印缓冲液,三明治结构 ,底层海绵,往上依次是3-4层滤纸,凝胶,膜,3-4层滤纸,海绵
海绵和滤纸在使用前要用转移液浸泡,在制作三明治结构时一定要避免凝胶干燥,滤纸内的气泡要用玻璃棒赶走
膜在用之前都要活化,PVDF膜要先浸泡5S-30s,然后在转移缓冲液中平衡,目的是活化膜上的正电基团,垂直电泳槽生产厂家,NC膜直接在转移液中平衡即可
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核酸电泳槽操作与保养
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核酸电泳操作:
1、待凝胶聚合后,轻轻拔掉加样梳(注意:先拔一侧,否则垂直拔出会使胶孔产生真空,导致部分凝胶被带出加样孔),垂直电泳槽批发,把凝胶托盘连同凝胶一起移入电泳槽中。
2、在电泳槽中加入电泳缓冲液,使凝胶全部被浸没,液面应高出胶面1.5mm—2mm左右。
3、在拔掉样品梳之后留下的加样孔内加样,垂直电泳槽厂商,在加样时要注意避免引入气泡。
4、盖好上盖,接通电泳仪电源,注意不要接错正负极。
5、根据实际情况选择适宜的电泳电源参数进行电泳,长胶需较高电压,采用高电压所需电泳时间较短,但发热高,分辨率低,适合筛选样品或检查样品纯度;反之,低电压,发热少,分辨率高,但耗费时间较长。
6、电泳实验结束后,先关闭电泳电源,随之拔出电泳槽导线(1红1黑),取出凝胶托盘。
日常维护与保养
包装后的产品贮存环境温度应在- 40℃~55℃、相对湿度不超过93%、无腐蚀性气体和通风良好的室内。
使用时注意保持电泳槽的清洁,可用海绵沾少许洗涤剂清洗,再用无离子水冲洗干净,放在无灰尘处晾干备用。
备注:本产品的凝胶托盘上具有荧光刻度线,便与紫外观察。
核酸电泳的原理
1.核酸分子中糖-磷酸骨架中的磷酸基团,呈负离子化状态;核酸分子在一定的电场强度的电场中,他们会向正电极方向迁移;
2.电泳中使用无反应活性的稳定的支持介质,电泳迁移率(或迁移速度)与分子大小、介质粘度等成反比;
因此,可在同一凝胶中、一定电场强度下分离出不用分子量大小或相同分子量但结构型有差异的核酸分子。
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