产品简介
江苑生物研发的超敏ECL化学发光检测试剂盒是一种超高灵敏度的以luminol为基础的ECL化学发光检测试剂盒。本产品可与抗体上偶联的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)发生化学反应,产生荧光,从而可以通过X光压片或其他适当荧光成像设备(CCD相机等)检测样品,检测灵敏度可达飞克(fg)级。本产品优化了底物的成分,应用了新型的增强剂和氧化剂,发光强度更高,稳定性更好,不含有毒试剂,安全性更高。
江苑生物生产的ECL化学发光检测试剂盒有两种,常规的Western检测,例如丰富度较高的目的蛋白检测,优先推荐使用高敏ECL化学发光检测试剂盒。对于低丰度较难检测的目的蛋白,优先推荐使用检测灵敏度更高的超敏ECL化学发光检测试剂盒。
保存条件
4 ℃保存,1年有效。若长期不用,可以-20 ºC保存,延长有效期。
注意事项
1.ECL A液和B液在吸取过程中必须要更换吸头,A液和B液相互污染后会逐渐失效。各溶液使用后,请盖紧瓶盖,特别是B液,含有氧化剂,容易被还原而失效。
2.如果目的蛋白条带过曝,可以缩短曝光时间,或者减少样品、一抗及二抗的用量。
3.如果荧光迅速淬灭,可能原因是目的条带荧光过强,导致HRP迅速消耗ECL。
4.如果没有发光信号,可能是目的蛋白表达很弱,可延长曝光时间。
5.金属氧化物颗粒可能会造成膜上出现颗粒状斑点,避免使用带有锈迹的剪刀以及镊子,建议使用塑料的平头镊子。
6.应使用高质量保鲜膜。质量较差的保鲜膜可能会淬灭荧光或由于含有杂质而污染印迹膜造成曝光背景值偏高。
7.避免将多张膜置于同一个洗膜盒内洗膜,相互吸附或摩擦可能造成很深的背景。
8.叠氮化钠(NaN3)能抑制HRP活性,若回收HRP标记探针或者抗体应避免使用NaN3,如必需使用勿超过0.01%。
9.本产品仅用于科学研究,不得用于临床诊断和治疗,不得用于食品和药品,不得存放于普通住宅内。
10.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
1.工作液配制:将超敏ECL A液和超敏ECL B液按体积比例1:1混合,现配现用。
Note:为了获得更佳效果,使用前准备工作液并立即使用。吸取A液和B液时一定要换枪头,以免污染试剂。
2.用平头镊从TBST或PBST中取出印迹膜,搭在滤纸上沥去膜上多余的液体,但不要接触膜的蛋白面,不要让膜干燥。
3.将膜上有蛋白的一面朝上平整地铺在检测板上,加上配好的工作液。用量以覆盖膜为基准,1 mL工作液可以覆盖大约10 cm2的膜。
4.将膜与工作液孵育1-2 min,以确保整个表面覆盖。
5.通过放射自显影胶片或成像设备获取信号。对于一个未知的信号,可调节不同曝光的时间来获得更佳结果。