产品简介
Annealing Buffer for RNA Oligos (5×),即 RNA 寡核苷酸退火缓冲液,可以用于 RNA Oligos
的退火,可以有效避免 RNAOligos 自身形成发夹结构, 有利于退火的正确进行。 该退火缓冲液不含 RNase,可避免RNA 的降解。
保存条件
常温配送。一个月内,4ºC保存。-20ºC长期保存,至少1年有效。
注意事项
1. RNA 易降解,需严格遵守 RNA 操作规范,防止 RNase 污染。
2. 本产品仅用于科学研究,不得用于临床诊断和治疗,不得用于食品和药品,不得存放于普通住宅内。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
1.将 RNA Oligos 用 DEPC 水配制成 200 µM,融化 RNA 退火缓冲液(5×) ,混匀备用。
2. 配置如下退火反应体系,混匀。
DEPC Water 30 µL
NA 退火缓冲液(5×) 20 µL
NA Oligo A (200 μM) 25 µL
NA Oligo B (200 μM) 25 µL
总体积 100 µL
3. 退火方法一: 将退火反应体系置于 PCR 仪中, 设置反应条件: 90℃变性 1 min, -1℃/60s/cycle 缓慢降温至 25℃。 程序设置以 Bio-Rad 的 T100 为例为: 1. 90℃, 1:00; 2. 90℃, 1:00, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2,65X; 4. 4℃, ∞。
4. 退火方法二: 将退火反应体系放于 90°C 水浴锅或金属浴, 持续 1 min,后将退火反应体系置于一杯含有90°C 水的保温杯中,让其开盖自然冷却至室温。
Note: 缓慢降温对形成正确的结构是非常有帮助的,降温过快将导致错误结构的产生。
5. 退火结束后可以直接用于转染细胞,也可以-80ºC 冻存备用。