产品信息
名称KHM-5M (人甲状腺癌细胞(未分化)) (STR鉴定正确)
别称KHM/5M; KHM5M
种属人类
年龄(性别)男性,65岁
组织来源甲状腺未分化(间变性)癌;转移部位:胸腔积液
生长特性贴壁细胞
细胞形态成纤维细胞样
生物安全等级1
推荐传代比例1:3-1:6
推荐换液频率2~3次/周
倍增时间~27小时(JCRB)
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
保藏机构JCRB; JCRB0148
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KHM-5M人甲状腺癌细胞传代操作步骤:
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用。
4.KHM-5M人甲状腺癌细胞KHM-5M用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min。
2.弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。