产品信息
别称MIA-PaCa-2;MIA-PACA-2;MIA-Pa-Ca-2;MIAPaca2;MIAPaCa2;MiaPaCa-2;MIAPACA-2;MiaPaca.2;MiaPaCa2;Miapaca2;MIAPaCa2;MIAPACA2;MiaPACA2;MIAPaCa-2;PaCa2
背景描述TheMIAPaCa-2celllinewasestablishedbyA.Yunis,etal.in1975fromtumortissueofthepancreasobtainedfroma65-year-oldCaucasianmale.
种属人
年龄（性别）男；65岁
生长特性半贴半悬
细胞形态上皮样贴壁细胞，伴有圆形漂浮细胞
细胞类型肿瘤细胞
肿瘤类型胰腺癌细胞
生物安全等级1
生长培养基DMEM＋10%FBS＋2.5%HS＋1%P/S
推荐传代比例1:3-1:8
推荐换液频率2~3次/周
倍增时间26hours(PubMed=25984343);25.7+-4.3hours(PubMed=27067801);40hours,18hours,inserum-freemedium(PubMed=23386380);~40hours(ATCC);~30-40hours(DSMZ)
冻存条件
冻存液：55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度：液氮
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
温度：37℃
MIA PaCa-2人胰腺癌细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备基础培养基( GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸钠 0.11g/L)；优质胎牛血清，10%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） MIA PaCa-2人胰腺癌细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。