飞凡检测中心服务简介
当在细菌、酵母或哺乳动物细胞系中表达时,宿主细胞蛋白 (Host Cell Protein, HCP) 通常与药物产品共纯化,是药物产品在制造过程中经常产生的杂质。
HCP 通常是源自宿主生物体的低水平内源性蛋白质,通常难以纯化或检测,成品中的 HCP 会降低药物的疗效或引起不良的免疫原性反应,影响治疗活性。
检测和表征 HCP 对于生物制药表征分析至关重要。
谱奥特提供基于2D DIGE及基于质谱的HCP分析。
飞凡检测基于2D DIGE的HCP分析
飞凡检测可通过使用高分辨率大面积的 2D 荧光蛋白质印迹提供最全面的 HCP 抗体覆盖率分析。
检测结果包括 HCP、Western 印迹和 HCP/Western 叠加图像,抗体覆盖率可实现可视化,这是其他检测方法无法实现的。
此外, HCP 抗体覆盖率的计算具有高度的一致性和准确性。
可用于表征 HCP 抗体覆盖率及检测蛋白类生物药和疫苗细胞在生产过程中产生的 HCP 污染物。
2D DIGE的HCP分析相较于 ELISA、和标准 2D 蛋白质印迹具有显着优势:
1、一致性高:来自相同凝胶和相同膜的 HCP 和 WB 图像进行叠加,消除了传统 2D WB 中出现的任何凝胶到凝胶或凝胶到膜的差异;
2、xingjiabigao:由于只需要一张凝胶,因此节省了重复凝胶的成本;
3、高精度:荧光 CyDye 标记可以准确定量蛋白质和 WB 斑点;
4、高灵敏度:荧光 CyDye 标记比银染具有更高的灵敏度和更宽的动态范围。
飞凡检测基于质谱的HCP分析
LC-MS/MS 包括 GeLC-MS/MS 蛋白质组学分析可以鉴定混合物中的所有蛋白质,从一维凝胶条带、IP 样品到全细胞裂解物或组织均可进行HCP分析。
基于质谱的HCP分析一般流程包括:通过 pI 或 Mw 对蛋白质混合物(1D 凝胶条带或液体样品)进行蛋白质分级(可选);还原/烷基化和胰蛋白酶消化样品后通过HPLC进行分离后质谱检测;搜库识别鉴定得到的蛋白质信息。
飞凡检测使用最新的高分辨率纳米液相色谱电喷雾 (nanoLC-ESI) OrbiTrap 质谱,我们可以以最高的准确性对这些含量极低的杂质进行检测和表征。
1、样品类型:溶液样品、凝胶内样品或 IP 微珠均可送样;
2、蛋白质量:我们推荐每个样品中 5-200 µg 的总蛋白质;
3、蛋白质浓度:我们推荐 5-20 mg/ml的样品浓度;
4、缓冲液:理论上常规使用的缓冲液均可送养,但因涉及后续试验,请告知我们您的缓冲液类型。