组蛋白修饰位点检测
组蛋白(histones)存在于高等真核生物体细胞染色质中,因富含精氨酸和赖氨酸而呈碱性,可与带负电荷的双螺旋DNA结合成DNA-组蛋白复合物。在组蛋白酶的作用下,组蛋白会发生不同的修饰,如:甲基化、乙酰化、磷酸化、腺苷酸化、泛素化、ADP核糖基化等。组蛋白修饰在一定程度上会导致转录激活或基因沉默,从而调控基因表达,影响免疫系统和免疫反应,甚至导致肿瘤等疾病的发生。因此,对组蛋白修饰位点的检测分析具有重要的生物学意义。
组蛋白修饰位点检测技术
目前,组蛋白修饰位点检测技术主要有传统的放射性同位素标记法、Edman降解法、免疫测序法以及基于质谱的检测方法等。
放射性同位素标记法有较强的放射性辐射,且整个试验周期耗时较长;Edman降解法需要大量高纯度的样品,并且不能鉴定N端封闭的蛋白序列;免疫测序法需要使用昂贵的专一性抗体,且只能检测已知的修饰的位点,不能检测新的、未知的修饰位点。
新兴的基于质谱的鉴定方法主要有“自上而下”和“自下而上”两种策略。“自上而下”的质谱检测方法是直接将样品组蛋白引入质谱中进行裂解,对裂解得到的多肽分子进行生物信息分析从而推演多肽序列和修饰的位点。“自下而上”的质谱检测方法则是先将组蛋白酶解成多肽分子再进行液相色谱串联质谱分析,zuì后利用生物信息检索推演多肽序列和修饰的位点。基于质谱的组蛋白修饰位点检测技术,具有快速、准确且能检测新的、未知的组蛋白修饰位点等优点,在组蛋白修饰位点分析方面得到了广泛应用。
百泰派克生物科技提供基于质谱的组蛋白修饰位点检测服务,质谱技术主要用于蛋白质翻译后修饰的鉴定,包括对修饰类型的鉴定,蛋白修饰定量鉴定、蛋白修饰位点鉴定等。欢迎免费咨询152-0137-7680。
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北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。
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