蛋白质序列即氨基酸排列顺序是蛋白质重要的理化性质,对蛋白质种类鉴定以及gāo级结构预测等具有重要意义。随着生命科学技术的发展进步,先后涌现出了诸多蛋白质测序技术,可以大致将其分为质谱法和非质谱法,非质谱法主要包括Sanger法、Edman降解法、二硝基氟苯法、丹磺酰氯法、肼解法以及羧肽酶法等,其中Edman降解法是zuì常用的非质谱法。
质谱法和Edman降解法都可以用于蛋白质序列分析,但是二者在分析原理和可以测定的序列区域上具有很大的差别。Edman降解法是一种针对N末端氨基酸的测序方法,其通过三个连续的化学反应可以切下一个N末端氨基酸残基,并对该氨基酸进行鉴定,然后将少了一个氨基酸的蛋白质再次进行以上操作,如此循环,每次循环鉴定一个氨基酸残基。但是,末端修饰或封闭的氨基酸不能进行上述化学反应,因此,Edman降解法对N末端修饰或封闭的蛋白质无能为力。
质谱法利用质谱仪采集蛋白酶切后生成的肽段母离子的碎片信息,通过鉴定各肽段的氨基酸组成和序列实现蛋白层面的序列分析。相比Edman降解法,质谱法可以实现蛋白质的全长序列分析,还可以用于N末端发生修饰的蛋白质序列分析,打破了Edman降解法的局限性。此外,质谱法还可以进行从头测序,为测定全新的或者没有理论数据库的蛋白质序列提供了解决方法。
百泰派克生物科技采用岛津公司Edman测序系统以及Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台结合Nano-LC色谱,提供基于质谱法的蛋白质序列分析服务技术包裹,可以对各种蛋白样品进行C/N末端测序、全长序列测定以及从头测序等,欢迎免费咨询。
百泰派克生物科技-生物药物表征,生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。
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