圆二色谱技术可以用来分析蛋白质的空间结构,那么它是如何对空间结构进行分析的呢?
蛋白质溶液经圆二色谱检测后会得到圆二色谱图,谱图反应的是平面偏振光波长与蛋白对左右偏振光的吸收系数之差之间的关系。圆二色光谱图的波长范围分为近紫外区(178~250nm)和远紫外区(250~320nm),主要通过远紫外区的图谱信息对蛋白质的结构进行分析,因为远紫外区的光谱反映的是蛋白肽键的圆二色性,而近紫外区反应的主要是一些不对称环境中的芳香氨基酸残基以及二硫键的信息。不同蛋白质或多肽二级结构的肽键产生的光谱图在谱带以及吸收强弱上都不相同,如α-螺旋分别在192nm处有一正峰、222nm和208nm处有一负峰,β-折叠在185~200nm区间有一正峰、216nm处有一负峰。因此,根据蛋白样品的远紫外光谱图所反应的信息,可以对蛋白的二级结构进行鉴定。
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