HPLC（high performance liquid chromatography），高效液相色谱，又称高效液相层析法、高压液相色谱，是近20年在液相色谱技术基础上发展起来的一种新型分析技术，用可于分离、鉴定和量化不易挥发有机化合物中的各种成分。
HPLC与液相色谱法的原理基本相同，不同之处在于HPLC 通过高压泵对混合物施加压力，使其快速通过装有固体吸附剂的色谱柱，分离速度得到提升；此外，高灵敏度的检测器和高效微粒固定相的使用也大大提高了HPLC 的分离效能和灵敏度。
HPLC 广泛用于蛋白混合物的分离和纯化。由于不同蛋白质的相对分子质量和体积不同，所以流经色谱柱的速度也有所差异，高效液相色谱正是利用这一点实现对蛋白混合物的分离，进而达到纯化的目的。此外，HPLC还可以与质谱技术相结合，对分离的蛋白质进行定性和定量分析。
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