核酸电泳常用染色液
1、溴化乙锭(ethidium bromide,琼脂糖水平电泳槽批发, EB)
较为常用的核酸荧光染料,可嵌入核酸双链的配对碱基之间,琼脂糖水平电泳槽,在紫外线激发下,发出桔红色荧光。
EB-DNA复合物中的EB发出的荧光,比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍,因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型。
若EB背景太深,可将凝胶 浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCI2中5min,使非结合的EB褪色,这 样可检查到10ng的DNA样品,EB也可用于检测单链DNA或RNA,但其对单链核酸的亲和力相对较小,荧光产率也相对较低。
2、吖啶橙(acridine orange, AO):
吖啶橙可嵌入双链核酸碱基对之间,在254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光;还通过静电与单链核酸的磷酸基结合,在254nm紫外线激发 下产生640nm的红色荧光。
因此可区分单链和双链核酸,灵敏度分别为0.1μg和0.05μg。
但吖啶橙的染色操作要求严格,应在 22℃,0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.0)中避光浸泡30min,然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时。
3、亚甲蓝(methylene blue)
可将RNA染成蓝色,但灵敏度不高,而且操作时间长。
染色过程:胶浸泡于0.02%的亚甲蓝,10mmol/L Tris-Ac(pH8.3),4℃放置1~2h,用净水洗5~8h(反复换水),带型肉眼可见,较低检测量为 250ng。
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转印电泳注意事项
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一、功能概述
本产品可快速、高质量地转印小型凝胶,它可容纳2个凝胶转印夹,琼脂糖水平电泳槽生产厂家,可同时转印两块小型凝胶。
1、一小时内转印2块10×7.5㎝凝胶;也可进行低强度的过夜转印。
2、电极丝相距4㎝可以产生强电场保证有效的蛋白转印。
3、具有颜色标记的转印夹和转印模块能够确保凝胶的正确定向。
二、注意事项
本产品内安装的铂金丝电极易断,使用中应小心操作,铂金丝不在保修范围之内,提醒客户清洗电泳槽时细致观察小心触碰!
附:缓冲液配比(推荐)
5X电泳缓冲液:15.1g Tris 94.0g Gly 5.0g SDS 配成1L
转移缓冲液:3.03g Tris 14.42g Gly 200mL CH3OH 配成1L
LF-Mini3型 小型垂直电泳槽
技术参数:
外型尺寸(L×W×H):180×130×160mm
凝胶板规格(L×W):83×73mm
样品梳:10/15齿,1.0mm厚(标配);
10/15齿,1.5mm厚(选配);
10/15齿,0.75mm厚(选配);
产品特别:
槽体采用高透明度PC材料注塑成型,多重安全设计,免除了可能产生的操作安全问题。
安全按钮式开盖设计,方便电泳槽盖的开启。
玻璃板与垫条的一体化设计,备选多种厚度的玻璃板和制胶梳子、专用制胶架,操作方便,可同时运行二块8.3×7.3cm的凝胶,琼脂糖水平电泳槽厂商,可与LF-ZY01型转印电泳槽配套使用,国际流行外型设计,精品理念,达到国外同类产品同等水平。
产品用途:广泛应用于各种蛋白凝胶电泳。
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